Estandarización de las pruebas de Elisa y Western Blot para la detección de IgA específica contra E. coli en orina

Castillo Bósquez, Sharon Ibeth (2016) Estandarización de las pruebas de Elisa y Western Blot para la detección de IgA específica contra E. coli en orina. Masters thesis, Universidad de Panamá.

[img]
Preview
Text
TM38644B65.pdf - Accepted Version

Download (1MB) | Preview

Abstract

EI presente estudio tuvo el objetivo de estandarizar cualitativamente una prueba de ELISA y de Western Blot para detectar IgA especifica contra E. coli en orina. En la estandarización de la prueba de ELISA los micropocillos fueron recubiertos con una solución de OM-89 de 4 ug/ml. La dilución adecuada del conjugado fue de 1:50,000; la muestra de orina fue utilizada sin diluir; y los tiempos de incubación de la muestra y del conjugado correspondieron a 2 horas y una hora respectivamente. Se seleccionaron 32 controles negativos, con urocultivos negativos y una visible negatividad en pruebas de ELISA para detectar IgA específica contra E. coli en orina en análisis previos. Se obtuvo un punto de corte de 0.779. De 109 muestras de orina analizadas por ELISA, 27 fueron positivas, de las cuales 17 tenían urocultivos positivos por E. coli; nueve tenían urocultivos negativos, y una tenía urocultivo positivo por Klebsiella pneumoniae. De las muestras positivas por ELISA, 15 fueron analizadas por Western Blot. Resultaron todas positivas, obteniéndose reacción contra proteínas de pesos moleculares aproximados de 21kDa a 152kDa. Las más inmunogénicas fueron de aproximadamente 152kDa y de 49kDa. En la literatura se reportaron dos proteínas correspondientes, la ARN polimerasa subunidad beta dirigida por ADN (RpoB) de 151kDa y la Biotin Carboxilasa (accC) de 49kDa. Se concluye que estas pruebas permiten valorar cualitativamente la presencia de IgA específica contra E. coli en orina. Tienen una valiosa aplicación clínica e investigativa para evaluar el efecto del uso de medicamentos e inmunoestimuladores utilizados para tratar infecciones de las vías urinarias, en estudios de seguimiento y/o comparativos.

Item Type: Thesis (Masters)
Uncontrolled Keywords: Infecciones urinarias
Subjects: R Medicine > RZ Other systems of medicine
Divisions: Facultad de Medicina
Depositing User: Luis Rodriguez
Date Deposited: 07 Feb 2018 14:42
Last Modified: 03 May 2018 22:11
URI: http://www.repositorio.up.ac.pa/id/eprint/5353

Actions (login required)

View Item View Item